金柑MLP2–2基因抑制蛋白酶活性的功能分析
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国家自然科学基金项目(31200963);湖南省教育厅项目(18A091)


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    摘要:

    MLP2–2基因是存在于金柑中的一种H2B蛋白互作基因。对金柑MLP2–2基因进行生物信息学分析,发现MLP2–2蛋白序列中存在跨膜结构域,与Kunitz蛋白酶抑制剂具有同源性;对2年生金柑幼苗进行冷驯化,提取叶片RNA,反转录获得MLP2–2基因的cds序列,转入pBRT7质粒构建pBRT7–MLP2–2过表达载体后,侵染Rosetta(DE3)大肠杆菌工程菌,获得目的蛋白,并检测MLP2–2蛋白对金柑蛋白提取液的蛋白降解率。结果表明,MLP2–2抑制了16%的金柑蛋白质的降解,说明MLP2–2蛋白具有蛋白酶抑制剂活性。

    Abstract:

    The miraculin-like protein gene MLP2-2 is a H2B protein interaction gene in kumquat. Bioinformatics analysis of the MLP2-2 gene found that the coded protein has a transmembrane domain and has homology with the Kunitz protease inhibitor. Two-year-old kumquat seedlings were subjected to cold acclimation, and the leaf RNA was extracted to obtain the cds sequence by reverse transcription to construct the pBRT7-MLP2-2 over-expression vector, then it was transferred to Rosetta (DE3) Escherichia coli engineered bacteria to express the target MLP2-2 protein. The effect of MLP2-2 on protein degradation rate of total protein extraction from kumquat leaves was detected. The results show that MLP2-2 inhibited kumquat protein degradation by 16%, indicating MLP2-2 have protease inhibitor activity.

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引用本文

乔克威,滕进婧,周小云,李健,刘明新,杨华.金柑MLP2–2基因抑制蛋白酶活性的功能分析[J].湖南农业大学学报:自然科学版,2022,48(1):.

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