甘蓝型油菜BnaSDG8基因CRISPR/Cas9敲除载体的构建及功能探究
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作物种质创新与资源利用国家重点实验室科学基金开放项目(12KFXM10)


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    以甘蓝型油菜‘湘油15号’为试材,通过生物信息学分析,运用CRISPR/Cas9系统对BnaSDG8第1个外显子上的BnaSDG8–A和BnaSDG8–C保守序列区域进行CRISPR/Cas9敲除位点设计,构建了CRISPR/Cas9敲除载体pCAMBIA1300–sgRNA/Cas9–BnaSDG8;通过遗传转化,获得转化植株19株;经测序比对,4株植株的BnaSDG8被成功编辑;通过对定向敲除植株开花时间的统计分析,初步确定BnaSDG8参与甘蓝型油菜开花时间的调控。

    Abstract:

    In this study, Brassica napus L. ‘Xianyou 15’ was used as the test material. By bioinformatics analysis, the CRISPR/Cas9 knockout sites were designed for the BnaSDG8–A and BnaSDG8–C conserved sequence regions on the first exon of BnaSDG8. The CRISPR/Cas9 knockout vector pCAMBIA1300–sgRNA/Cas9–BnaSDG8 was successfully constructed; 19 transformed plants were obtained through genetic transformation, 4 plants were successfully edited in 19 transformed plants. In addition, through the statistical analysis of flowering time of directional knockout plants, the BnaSDG8 is involved in the regulation of flowering time of Brassica napus L.

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引用本文

李东昊,姜玲,刘春林,阮颖.甘蓝型油菜BnaSDG8基因CRISPR/Cas9敲除载体的构建及功能探究[J].湖南农业大学学报:自然科学版,2018,44(4):.

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  • 在线发布日期: 2018-07-31
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