小鸭肝炎病毒现场分离株单克隆抗体的研制
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Preparation and identification of monoclonal antibodies against the locale isolated strain of duck hepatitis virus
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    摘要:

    尿囊液中的DHV经冻融、氯仿反复处理、PEG浓缩和超速离心的方法纯化后,免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术、应用间接ELISA方法筛选及多次亚克隆,成功获得阳性杂交瘤细胞8株, 分别命名为DHV-1、DHV-6、DHV-7、DHV-8、DHV-9、DHV-10、DHV-11和DHV-12,并制备出了腹水。8株单抗腹水经ELISA检测,DHV-7、DHV-8效价为1:2000,DHV-6、DHV-10效价为1:8000,DHV-1、DHV-9、DHV-11和DHV-12效价为1:32000~1:512000。抗体亚类鉴定,DHV-6、DHV-7、DHV-8、DHV-10为IgG1,DHV-1、DHV-12为IgG2a,DHV-2、DHV-9、DHV-11为IgG2b,上述抗体均为к链。特异性鉴定表明,上述单克隆抗体只能与从尿囊液中纯化的DHV病毒包板起反应,与非DHV抗原无反应。鸭胚中和试验及雏鸭保护试验表明DHV-6、DHV-7、DHV-9、DHV-10具有较好的中和活性并对雏鸭有不同程度的保护作用。

    Abstract:

    The BALB/c mice were immunized with DHV of allantoid liquid in duck embryo which purified by freezing and melting repeatedly, dealed with by chloroform , concentrated by PEG and overspeed membrane filtrating . Eight hybridoma cell lines were obtained after detecting and 3 sub-cloning by I-ELISA.They were named DHV-1、DHV-6、DHV-7、DHV-8、DHV-9、DHV-10、DHV-11 and DHV-12。The ascites titres of these MAbs were between 1:2000 and 1:512000. The ascites had no cross reaction with other antigen and the normal allantoid liquid in duck embryo. MAbs belonged to IgG withκchain. neutralization test and young duck pretection test indicated that neutralization characters of DHV-6、DHV-7、DHV-9、DHV-10 are better.

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周珍辉.小鸭肝炎病毒现场分离株单克隆抗体的研制[J].湖南农业大学学报:自然科学版,2011,37(1):78-81.

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  • 收稿日期:2010-06-02
  • 最后修改日期:2010-12-30
  • 录用日期:2011-01-25
  • 在线发布日期: 2011-01-31
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